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特長的詳細(xì)介紹
回收部的構(gòu)造
傳統(tǒng)的制備電泳裝置,回收部使用透析膜區(qū)分下部電泳緩沖液和目標(biāo)成分,但目標(biāo)成分會在電場作用下吸附在透析膜上,引起污染.而AE-6750S的回收部設(shè)計(jì)成兩個圓柱凝膠上下相挾的空間形式.通電后,電泳泳動分離出的目的成分溶于回收部中填充的回收液中.但目的成分不會吸附在回收部下部的凝膠上.

「斷續(xù)-空氣置換送液方式」
傳統(tǒng)的制備電泳分離裝置中,在電場的作用下,目的成分會吸附在回收部下部的透析膜上,所以必須使回收液連續(xù)快速流動來回收目的成分.所以目的成分會被回收液稀釋.

AE-6750采用的是回收液非循環(huán)方式.回收時,電泳也***同停止,回收液經(jīng)泵送至收集器回收,同時,向回收部注入***段時間空氣,使回收部保持空的狀態(tài).回收完成后,再由泵注入新的回收液,所以這***劃時代的先進(jìn)方法被稱為「斷續(xù)-空氣置換送液方式」.因?yàn)闊o需使用太多回收液,所以***大限度的防止目的成分被稀釋.

制備電泳Prepforesis S 的操作流程如下:
根據(jù)預(yù)備電泳(垂直板電泳)的條帶判定是否能分離
① 預(yù)備電泳: ↓
判定可以分離時,摸索確定分離條件
樣品濃度(分離的***適濃度和***后確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時的必須濃度)
凝膠濃度(參考預(yù)備電泳,摸索分離時的***適濃度)
電泳條件
↓
② Prepforesis S 進(jìn)行樣品分離前,必須進(jìn)行以下工作
泳動準(zhǔn)備 樣品,圓柱凝膠,緩沖液,回收液的配置
安裝電泳槽及電泳緩沖液的預(yù)備恒溫
分離條件的設(shè)定
向配管及回收部中添加回收液
添加樣品
↓
③ 開始自動分離: 添加樣品后,按照設(shè)定的條件進(jìn)行自動分離,回收
↓
④ 分離成分確認(rèn): 經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng)回收的分離成分,用Mini垂直板電泳或用活性測定來確認(rèn)
↓
目的成分可以確認(rèn)時,該分離成分可以用于活性測定,質(zhì)量分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)

圓柱膠的體積： 內(nèi)徑 16 mm/ 長 8mm
支架/膠濃度：PAGE膠 6% - 20%
樣品量：2.0 mg (質(zhì)量) / 2.0 ml (體積)
回收部體積：0.8 ml
緩沖液量：1000 ml
循環(huán)泵流量：650 ml/分鐘 (泵工作時間 1–999分鐘)
分離時間：1–999 分鐘 (1 分鐘 / 檔)
收集器輸出信號：MAKE接點(diǎn)/open collector 400 ms (step式信號) 15mA
電源輸出：恒定電流 5 mA , 10mA , 15mA , 20 mA , 25mA , 30mA , 40mA可變換輸出(梯度、程序)；異常輸出自檢功能
條件設(shè)定：輸出電流值 / 延遲時間 / 分離循環(huán)中的泳動通電時間 / 溶液回收時間/回收溶液充填時間 / 分離階段數(shù)
使用溫度范圍：5 - 65℃
控制內(nèi)容顯示：熒光LED顯示板 40 行 × 20 字
尺寸 質(zhì)量：260 (w) × 380 (l) × 420 (h) mm 11Kg

大鼠肌肉抽提物經(jīng)制備電泳Prepforesis S系統(tǒng),用SDS-PAGE分離回收
(制備電泳Prepforesis S的電泳條件)
樣品：大鼠肌肉抽提物
濃縮膠組成：4.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH 6.8 )
分離膠組成：12.5%PAGE Tris-HCL-SDS 緩沖液( pH8.8 )
分離膠長：20 mm
電泳用緩沖液：Tris-Gly-SDS 緩沖液
回收用緩沖液：Tris-HCL 緩沖液( pH8.8 ),20%蔗糖
回收液量：0.8 ml / 組分
分畫時間：5 分鐘
通電：15 mA恒定電流
泳動時間：10 小時
緩沖液溫度：20℃

用途
蛋白質(zhì)的分離?回收
從細(xì)胞?菌中分離目標(biāo)蛋白
從混合溶液中分離目標(biāo)蛋白
新發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的回收
要求分離能力時
必須的難溶性物質(zhì)為表面活性劑時
DNA的分離?回收
限制性酶片段的回收
PCR產(chǎn)物的回收

Prepforesis S制備電泳系統(tǒng)的特長
·回收部分的構(gòu)造***大限度的防止污染(特長***)
·特有的回收方式「斷續(xù)-空氣置換送液方式」(特長二)
·利用聚丙酰胺的高分離效果(優(yōu)于層析的分離效果)
·自動控制,操作簡單
·電泳槽,電源,泵,冷卻用熱交換器,控制部分***體化設(shè)計(jì)